荧光定量PCR检测
荧光定量PCR(Real-time qPCR)就是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。由于Real-time qPCR的众多优点,现在已经是生命科学领域的一项重要技术,并成为基因表达差异和文章发表不可或缺的部分。real-time qPCR输出的数据不同于常规PCR电泳检测,很多没有做过real-time qPCR的研究者常常感到高深莫测,不知从何入手;甚至一些做过一些实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑。很多时候,尽管知晓qPCR的原理和基本操作,仍然浪费时间和精力,而得不到好的结果或对大量的数据不知所措。
华科鉴联基因科技提供的real-time qPCR技术服务,根据实验目的,设计实验方案(相对定量或绝对定量;SYBR Green I或Taqman探针方法),用完全按照符合国际标准(MIQE)的real-time qPCR试剂完成实验,提供符合文章发表的客观事实实验报告和原始数据。
服务要求
需提供新鲜或保存完好的细胞(至少5×106)、组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料;或纯化好的总RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好)或总DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之间,完整性好);或反转录好的cDNA不少于30μl(反转录的总RNA完整性好,纯度在1.9-2.1之间); 同时提供待测基因序列或登录号。
报告内容
荧光定量PCR实验报告包括总RNA(或DNA)浓度,电泳图片,扩增曲线,熔解曲线,Ct值以及数据统计分析(可选),实验报告以及剩余引物和模板(华科鉴联基因科技可保存1个月)
实验报告部分组成
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